atcc菌種的培養(yǎng)要求嚴(yán)格，需遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，確保菌種的活性、純度和遺傳穩(wěn)定性。

　　一、atcc菌種培養(yǎng)基要求：

　　1.使用指定配方：

　　必須按照ATCC或說(shuō)明書(shū)提供的特定培養(yǎng)基配方，不可隨意替換成分。

　　2.培養(yǎng)基制備與滅菌：

　　自制培養(yǎng)基需高壓滅菌，冷卻至50℃以下再倒板或分裝。

　　市售培養(yǎng)基需選擇可靠品牌，并檢查保質(zhì)期和批號(hào)一致性。

　　3.添加特殊成分：

　　部分菌種需額外添加生長(zhǎng)因子、抗生素（如萬(wàn)古霉素）或血液（如羊血、馬血）。

　　二、atcc菌種操作規(guī)范要求：

　　1.無(wú)菌操作：

　　接種前用75%酒精擦拭臺(tái)面和器械，接種環(huán)需灼燒滅菌（酒精燈火焰中加熱至通紅）。

　　凍干菌種復(fù)蘇時(shí)，需快速解凍，避免污染。

　　2.傳代限制：

　　避免頻繁傳代，否則可能導(dǎo)致基因變異或活力下降。

　　長(zhǎng)期保存需用甘油管（-80℃）或液氮冷凍保存。

　　3.污染防控：

　　定期清潔培養(yǎng)箱，清除污染皿，并用紫外燈消毒。

　　若發(fā)現(xiàn)雜菌污染（如霉菌斑點(diǎn)），立即棄用并復(fù)查操作流程。

　　三、atcc菌種保存與管理要求

　　1.短期保存：

　　斜面低溫保存：菌種接種于斜面培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)后密封，4℃保存（通常1-4周）。

　　甘油冷凍保存：菌液與30%甘油混合（1:1），存入-80℃冰箱或液氮罐。

　　2.長(zhǎng)期保存：

　　液氮罐為最佳方法，需定期補(bǔ)充液氮。

　　凍干法（需專(zhuān)業(yè)設(shè)備）：真空凍干后密封，室溫或4℃保存。

　　3.存活性驗(yàn)證：

　　定期復(fù)蘇菌種（如每半年一次），檢查生長(zhǎng)狀態(tài)（菌落形態(tài)、革蘭染色結(jié)果）。

　　若活力下降，需從原始凍存管重新接種。