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  • 細(xì)胞株和菌株【豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞】注意事項(xiàng)

    細(xì)胞株和菌株【豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞】注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保...
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    2023-03-29
  • 熒光PCR檢測(cè)試劑盒常常需要精細(xì)操作

    熒光PCR檢測(cè)試劑盒是一種常用的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工具,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。其作用是在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))過程中通過熒光信號(hào)檢測(cè)DNA序列特定變化,檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo)DNA是否存在、是否出現(xiàn)特定變異或突變等。工作原理:PCR是一種在體外以無細(xì)胞為基礎(chǔ)的DNA復(fù)制技術(shù),包括DNA的兩個(gè)變性、引物、擴(kuò)增和DNA的再生。PCR檢測(cè)試劑盒的工作原理基本上是利用PCR技術(shù),通過引入熒光標(biāo)記物或探針來檢測(cè)PCR產(chǎn)物,轉(zhuǎn)化DNA目標(biāo)序列的檢測(cè)結(jié)果為熒光信號(hào)。熒光PCR檢測(cè)...
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    2023-03-15
  • 實(shí)驗(yàn)室常用的保菌方法

    菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù)。微生物在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退。菌種保藏的目的就是使菌株存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動(dòng)處于半永jiu性的休眠狀態(tài),也就是將微生物的新陳代謝作用限制在最di范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室常用的保菌方法有:甘油保菌法、斜面保菌法、穿刺保菌法、液體石蠟覆蓋保藏法、沙土保藏法、冷凍干燥法。微基生物在以上幾種菌種保藏方法的基礎(chǔ)...
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    2023-03-11
  • PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成

    人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因熒光PCR試劑盒適用于檢測(cè)氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因,用于人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至...
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    2023-03-02
  • 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程

    細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程儀器與試劑儀器試劑耗材離心機(jī)胎牛血清(FBS)離心管(15ml、50ml)生物安全柜無菌1×PBSpH=7.2T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶電動(dòng)移液器0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA一次性無菌移液管(2ml、5ml、10ml)CO2培養(yǎng)箱wan全培養(yǎng)基(含血清)1.8mL凍存管倒置顯微鏡液氮罐凍存液:90%FBS+10%DMSO異丙醇程序降溫盒恒溫水浴鍋超低溫冰箱護(hù)目鏡、厚毛線手套等操作流程復(fù)蘇1)將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃;2)準(zhǔn)備一支15ml離心...
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    2023-03-02
  • 菌種培養(yǎng)過程中需要注意哪些

    菌種保存條件:斜面、穿刺菌和凍干粉應(yīng)在4-10度保存,甘油菌在-80度保存。菌種培養(yǎng)條件:模式菌株:是培養(yǎng)溫度:37℃培養(yǎng)時(shí)間:24-48h需氧類型:5%二氧化碳生物安全級(jí)別:二級(jí)菌種培養(yǎng)注意事項(xiàng):1、微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;2、菌種操作在無菌條件下進(jìn)行,接種完畢應(yīng)該滅菌再做丟棄處理;3、斜面菌種和穿刺菌種保存時(shí)間通常為3-6個(gè)月,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)結(jié)轉(zhuǎn);凍干粉保存時(shí)間通常是2-25年;甘油菌保存時(shí)間為2-5年;4、凍干首-次...
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    2023-02-08
  • 何為PCR技術(shù)?

    PCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCR)是由美國(guó)PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))建立的。這項(xiàng)技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時(shí)反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),而且在DNA重組與表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測(cè)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DN...
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    2023-01-06
  • 核酸定量檢測(cè)試劑盒具體的操作步驟

    核酸定量檢測(cè)試劑盒反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速;具有使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,大程度地避免了非特異擴(kuò)增;抗干擾的能力強(qiáng),即使是血液、腫瘤、菌落等復(fù)雜樣本,也能獲得較為理想的結(jié)果等特點(diǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)的特點(diǎn)是設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分析速度快及靈敏度高?;瘜W(xué)發(fā)光成像分析是將化學(xué)發(fā)光與成像技術(shù)相結(jié)合,從而具有分辨率高、多樣品同時(shí)檢測(cè)、光譜響應(yīng)范圍寬以及靈敏度高等特點(diǎn)。已廣泛應(yīng)用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學(xué)發(fā)光信號(hào)檢測(cè)。核酸定量檢測(cè)試劑盒具體的操作步驟:1....
    技術(shù)文章
    2023-01-03
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